內(nèi)容簡介
在生命科學(xué)研究與生物制藥研發(fā)中,生物樣本(如蛋白質(zhì)、核酸、外泌體)的濃縮與純化是基礎(chǔ)且關(guān)鍵的實驗步驟,傳統(tǒng)方法往往存在操作復(fù)雜、樣本損失率高、耗時久等問題。Millipore 推出的 Amicon Ultra 系列離心管,基于先進(jìn)的切向流過濾(TFF)原理與創(chuàng)新的超濾膜技術(shù),改變了傳統(tǒng)樣本處理模式,為科研人員與研發(fā)人員提供了高效、便捷的樣本濃縮與純化工具,顯著加速了實驗進(jìn)程。
從技術(shù)原理來看,Amicon Ultra 離心管采用垂直式切向流過濾設(shè)計,區(qū)別于傳統(tǒng)的死端過濾,樣本在離心力作用下沿超濾膜表面流動,形成切向流,有效減少了膜表面的濃差極化現(xiàn)象。濃差極化是導(dǎo)致超濾膜通量下降、分離效率降低的主要原因,傳統(tǒng)離心管在濃縮過程中,膜表面易形成高濃度溶質(zhì)層,使通量在 10 分鐘內(nèi)下降 50% 以上,而 Amicon Ultra 的切向流設(shè)計可將通量維持時間延長至 30 分鐘以上,確保濃縮過程的穩(wěn)定性。同時,該離心管配備的超濾膜為再生纖維素(RC)材質(zhì),通過精準(zhǔn)控制膜的孔徑與孔隙率,實現(xiàn)了對不同分子量物質(zhì)的精準(zhǔn)截留,截留分子量范圍覆蓋 3kDa-1000kDa,滿足從小分子多肽到大型蛋白質(zhì)復(fù)合物的分離需求。
在操作性能上,Amicon Ultra 離心管展現(xiàn)出顯著優(yōu)勢。其采用 “一站式" 設(shè)計,集成了樣本加載、過濾、濃縮、收集等功能,無需多次轉(zhuǎn)移樣本,有效減少了樣本損失。通過對比實驗,在處理 1mL 濃度為 1mg/mL 的 BSA 溶液時,Amicon Ultra 離心管的樣本回收率達(dá)到 95% 以上,而傳統(tǒng)離心管的回收率僅為 80%-85%,尤其對于珍貴的臨床樣本(如患者血清外泌體),高回收率可最大限度保留樣本中的目標(biāo)成分,提高實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。此外,該離心管的最大樣本處理體積可達(dá) 15mL,最小濃縮體積可至 20μL,濃縮倍數(shù)最高達(dá) 750 倍,滿足不同實驗場景的需求,例如在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,可將大體積細(xì)胞裂解液快速濃縮至適合質(zhì)譜檢測的小體積樣本。
在兼容性與易用性方面,Amicon Ultra 離心管表現(xiàn)出色。其適配市面上主流的臺式離心機(jī)(如 Eppendorf 5417R、Thermo Scientific Sorvall ST 16R),離心轉(zhuǎn)速范圍支持 3000-14000×g,可根據(jù)樣本特性靈活調(diào)整。同時,離心管采用透明聚丙烯材質(zhì),便于觀察樣本濃縮過程,管蓋配備防滑紋路與密封膠圈,確保離心過程中無漏液風(fēng)險。在后續(xù)操作中,濃縮后的樣本可直接通過管底的取樣口吸取,無需打開管蓋,避免了樣本污染,尤其適合無菌實驗環(huán)境。
在實際應(yīng)用場景中,Amicon Ultra 離心管已成為科研與研發(fā)人員的工具。在分子生物學(xué)研究中,用于 RNA 提取后的濃縮,可將低濃度 RNA 溶液濃縮至 1μg/μL 以上,滿足逆轉(zhuǎn)錄 PCR(RT-PCR)的模板需求;在干細(xì)胞研究中,用于干細(xì)胞外泌體的純化,通過 300kDa 截留分子量的濾膜,有效去除外泌體樣本中的蛋白質(zhì)雜質(zhì),獲得高純度外泌體用于后續(xù)功能分析;在生物制藥研發(fā)中,用于重組蛋白的初步純化,快速去除發(fā)酵液中的小分子雜質(zhì),為后續(xù)的層析純化步驟奠定基礎(chǔ)。隨著生命科學(xué)研究的不斷深入,Millipore Amicon Ultra 離心管將持續(xù)為樣本處理提供高效支持,助力科研人員更快獲得高質(zhì)量實驗數(shù)據(jù),推動研發(fā)進(jìn)程。
關(guān)鍵詞:Millipore Amicon Ultra 切向流過濾 超濾膜 樣本濃縮 生物樣本純化